BÁO CÁO THỰC HÀNH
TÁCH CHIẾT DNA
1. Mục đích
- Tách
chiết được DNA từ các mẫu vật sống.
2. Kết quả và giải
thích
- Sau thực
hiện quy trình thí nghiệm, thấy xuất hiện búi kết tủa trắng đục chứa DNA nằm lơ
lửng trong lớp cồn.
3. Trả lời câu hỏi
Câu hỏi a SGK Sinh 12 Kết nối tri thức (trang 34): Tại sao phải sử dụng dung dịch nước rửa chén bát hay dung dịch tẩy
rửa?
Trả lời:
- Dịch nhân tế bào cần được giải phóng vào dung dịch chiết xuất để tách chiết được DNA do DNA nằm sâu trong nhân. Quá trình này đòi hỏi phải phá huỷ màng tế bào, màng nhân thông qua việc sử dụng các dung dịch tẩy rửa có khả năng hòa tan lipid. Đồng thời, việc phá vỡ mô để tách rời các tế bào cũng là điều kiện bắt buộc trước khi giải phóng DNA.
Câu hỏi b SGK Sinh 12 Kết nối tri thức (trang 34): Tại
sao cần sử dụng nước dứa? Có thể thay nước dứa bằng dung dịch gì?
Trả lời:
- Khả năng phá vỡ màng nhân và màng tế bào của nước dứa là do trong dứa có chứa enzyme bromelain, một loại protease có khả năng phân cắt protein (thành phần cấu tạo chính màng và nhân tế bào). Nhờ cơ chế này, DNA được giải phóng hoàn toàn ra khỏi cấu trúc tế bào.
-
Câu hỏi c SGK Sinh 12 Kết nối tri thức (trang 34): Tại
sao cần sử dụng cồn ethanol?
Trả lời:
- DNA đi từ dịch chiết tế bào lên phía trên, đẩy sát lại gần nhau và tạo thành vật chất kết tủa màu trắng đục nhờ tác động của ethanol trong hỗn hợp. Do ethanol có tỉ trọng nhẹ hơn nước nên sẽ tạo thành một lớp trong suốt tách biệt phía trên ống nghiệm, tạo điều kiện cho quá trình kết tủa DNA diễn ra tại lớp tiếp giáp này.
Câu hỏi d SGK Sinh 12 Kết nối tri thức (trang 34): Cần phải cải tiến, khắc phục điều gì để thu được kết quả tốt hơn?
Trả lời:
- Cần lưu ý
các điểm sau để thu được kết quả tốt hơn:
+
+ Chọn lựa
mẫu vật tốt,
+ Khi
nghiền mẫu cần phải nghiền kỹ, đảm bảo các mô và thành tế bào đều bị phá vỡ.
+ Lựa chọn
dung dịch tách chiết phù hợp với loại mẫu và ứng dụng cụ thể.
+ Thực hiện các bước làm sạch sau tách chiết để loại bỏ RNA hoặc protein tạp chất, tránh ảnh hưởng đến các thí nghiệm tiếp theo.
+ Sử dụng các phương pháp kỹ thuật như điện di trên gel agarose, PCR hoặc đo OD để kiểm tra và đánh giá hiệu suất tách chiết.
+ Kiểm tra và đánh giá hiệu suất tách chiết bằng cách sử dụng các phương pháp như đo OD, điện di trên gel agarose, PCR,...
---------------------------------------
>>> Full lời giải SGK Sinh học 12 - Kết nối tri thức: Xem ngay!